关键词不能为空

位置:淮南象牙塔成语大世界 > 成语造句 > PCR的原理是什么,它有什么用途

PCR的原理是什么,它有什么用途

作者:淮南象牙塔
日期:2021-04-20 23:56:54
阅读:

PCR技术需要的是DNA连接酶还是DNA聚合酶
Taq酶=DNA聚合酶(可耐72℃以上高温而不失活),核苷酸以母链为模版在引物(一段与母链前几个核苷酸配对的单核苷酸链,一般是含5-7核苷酸的核苷酸链)的作用下,由Taq酶(DNA聚合酶)帮助下合成子链,在这一过程中单核苷酸是在碱基互补配对的作用下自动连接于母链上的Tap酶作用就是将没有连接的磷酸二脂键连接上。
A、DNA连接酶和DNA聚合酶均能催化磷酸二酯键,A正确;
B、DNA连接酶作用对象是两个DNA片段,DNA聚合酶作用对象是脱氧核苷酸,B错误;
C、DNA连接酶不需要模板DNA,DNA聚合酶需要模板DNA,C错误;
D、DNA连接酶不用于PCR技术,DNA聚合酶可用于PCR技术,D错误。

PCR的原理是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5‘-3’)的方向合成互补链。

PCR最有价值的应用领域就是对感染疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR就可以检测到。

在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。

扩展资料

标准的PCR过程分为三步:

1、DNA变性:(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。

2、退火:(60℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。

3、延伸:(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸,合成与模板互补的DNA链。

每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量即增加一倍。

有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度。

参考资料来源:百度百科-PCR


引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点,引导DNA的合成。
能设定循环次数,及控制复制次数。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。

dNTP混合物:提供DNA结构的基础元件,像房子的砖瓦;
引物:DNA聚合酶无法从无到有合成DNA,需要一个3‘羟基,引物就是这个作用;
TaqDNA聚合酶:DNA聚合酶的一种,耐高温,保持高活性,使得PCR得以进行几十个循环;
还有PCR缓冲液,为整个反应提供一个合适的环境。

    相关推荐

    聚合标签
    请教一下这句话是什么意思? 司马迁《廉颇蔺相如列传》原文和译文 这张图谜底是什么? 解释:卧榻之侧,岂容他人酣睡 关于腾字的成语有哪些 卧榻之侧 岂容他人酣睡请问这句话什么意思? 是什么成语? 不什么不什么的成语 逃可以组什么词 流可以组什么词 死什么生什么的成语有哪些 对这句“痛饮狂歌空对月 形容“一动不动”的成语有哪些? 含有汤字的成语 三皇五帝中“五帝”分别是谁? 找了个女朋友她说话很尖酸刻薄.而且很顾娘家的人.脾气暴躁这样... 形容声音绵长悠扬的成语 厚字开头的成语接龙 腾开头有什么成语 成语昼夜无眠的意思 内的成语有哪些 侧卧之榻 鲁迅的一件小事全文详细赏析!跪求了! 形容自在安闲舒适的样子成语 完美公司的网络游戏 歪偏旁部首是什么 怎么填合适词语? 前面有我字的成语 什么水什么相的成语有哪些 人生的路,说长不长说短不短,每段路有每段路 来自 请求推荐:寓意平安的婉约诗词 带有汤字的成语有哪些 无什么不什么式的词成语 曹操曾经这样评价袁绍“色厉胆薄,好谋无断,干大事而惜身,见小... 趔 读什么 谋士谁认为袁绍外宽内忌,不念忠诚 从上海浦东机场到第九人民医院具体路线?步骤越少越好! 红旗上面腾腾腾打一成语 蚬子不张嘴,是不是死了? 秦国和楚国最后那个国统一天下了 这是真的吗????急急急急急急急急急,我着急呀 带有“地”字的成语有哪些? 歇后语 形容心里忐忑不安,平静不下来 第二个字是铁的成语 古今中外的诗歌收集分类 收集有关知识 左边不出头,右边不出头,不是不出头,就是不出头 猜一字:(... 含‘无’形的成语 求『我是一名幼儿教师』演讲稿! 一动不动的近义词是什么? 郭德纲相声《偷斧子》里面的唱词(我佛耶……那段)是什么曲子?... 帮忙找一部小说, 金庸笔下唯一真正的大侠是谁,他一生从来没有杀一个好人,黑道何... 飞黄腾达是什么意思? 请高人帮忙取名 谢谢 如何用食物调节身体阴阳? 形容死的成语 老是不知道在害怕着什么,忐忑不定的心情 带臂的成语 与胸部有关的成语有哪些? 花蛤放水里不开口是活着还是死了 郭德纲于谦《买挂票》台词? 急 玄武门之变后,李渊的晚年生活过得怎么样? 王勃写的诗句有哪些 描写心情喜悦的成语 Aabb,还有哪些? 找一部小说 语文三年级下册第30课西门豹课后生字的拼音 婉转悠扬 哪个字错了